LET'S TALK ABOUT VITRIFICATION...
EGG AND EMBRYO FREEZING - VITRIFICATION
The techniques that are performed in an embryology laboratory are progressing with impressive rhythms. Everything new, adds either a larger and or a smaller step in achieving more impressive results in the field of Clinical Embryology. After the Intracytoplasmic sperm injection (ICSI), the next great advancement in embryological techniques is the oocyte and embryo Vitrification (fast freeze-Vitrification).
VITRIFICATION - WHAT IS IT ?
Vitrification is a cryopreservation protocol, in which high concentration of cryoprotectant is used for a short time period, while a temperature reduction is achieved at the same time by direct immersion of the oocytes or the fertilized oocytes in liquid nitrogen surrounded by an extremely small amount of cryoprotectant.
This leads in avoiding possible toxic effects from high concentrations of cryoprotectants on oocytes or embryos, while protecting the cytoplasm from intracellular crystal structures (ice crystals). During vitrification, the molecules move less and eventually create a stable structure to temperatures below -100 C, turning the biological material "glassy" avoiding its literally "freezing" and ice formation.
This technique is particularly fast, with great importance on details and requires high technical skills of the embryologist.
The replacement of slow freezing by Vitrification improves spectacularly the efficiency of cryopreservation, providing oocyte and embryo survival rates after thawing, which exceed the 95% -98%.
WHERE IT IS USED
Due to the high survival rate after thawing, oocyte-embryo vitrification is beneficially applied to:
EGGS
1. For oocyte cryopreservation of women who do not wish to have a baby yet (social freezing). With this method the oocytes are "reserved" in the age of the woman during freezing, no matter how many years after will be thawed. This can avoid the negative effect of time on the quality of woman's oocytes.
2. For oocyte cryopreservation of women that undergo treatment that might adversely affect the quality of their eggs, such as radiation, chemotherapy, etc.
1. To preserve oocytes in cases where finding husband’s/ partner’s sperm on the day of oocyte retrieval is not possible (azoospermia, sperm collection weakness etc.).
2. Egg Donation Bank founding.
2. To collect sufficient number of oocytes in cases of women with poor drug response (poor responder) before performing fertilization (ICSI) and embryo transfer. In this way, the couple benefits because it is charged the cost of ICSI only once.
EMBRYOS
1.For cryopreservation of super numerous embryos after embryo transfer, whose development and morphology satisfy the cryopeservation criteria set by the Embryology Laboratory.
2. For the cryopreservation of all embryos after IVF, when the hormonal profile of the woman on the day of embryo transfer is not consistent with satisfactory success.
VITRIFICATION REQUIREMENTS
As mentioned above, vitrification is a highly demanding technique. When applying Vitrification a strict Protocol is required to be followed, with absolute respect to the details, precise movements and high speed in its operation. The laboratory equipment required is neither complicated nor expensive. On the contrary, the reagents and the consumables used have a fairly high cost.
EGG AND EMBRYOS CRYOBANKING
After cryopreservation, oocytes and embryos, are kept in special tanks (cryotankers), filled with liquid nitrogen. The cryotankers are particularly reliable and safe, since they are provided with external signs of the internal level of liquid nitrogen and the temperature. They also have audio and visual alarm if any of the parameters mentioned above (liquid-nitrogen temperature level) falls below certain limits. They can also be connected to a central control system that informs via sms the responsible Embryologist if any of the above has gone out of accepted limits.Last but not least, in our daily Embryology Laboratory quality control practice, the containers are checked by the responsible for this task embryologist.
Inside the cryopreservation containers, each couple’s embryos or oocytes are kept in a perfectly defined place, which is exclusive for each case during cryopreservation. The vitrified embryos or oocytes are additionally labeled with the name of the woman, the freezing date and the unique code supplied with the woman in our unit. Furthermore, each case’s place is written in the folder of the couple/ woman, in cryopreservation file in the Embryology Laboratory, and electronically in the Database of ASSISTING NATURE
.Oocytes and embryos are therefore extremely safe regarding keeping them intact and maintaining their identity
.Biological limit for cryopreservation time does not exist, vitrified oocytes and embryos can be cryopreserved for as long as it is necessary without any difference in survival or quality after thawing.
On the contrary there is Legal restriction and the couples / women should be informed prior to freezing and sign consents. It is the couple’s/woman’s responsibility to communicate every year with the Cryopreservation Bank, to inform the responsible Embryologist of their intentions about their cryopreserved biological material (continue to be maintained, to be destroyed, to be donated, used for research-therapeutic purposes).
ASSISTING NATURE RESULTS
The ASSISTING NATURE pregnancy rate , after thawing and transfer of cryopreserved embryos is particularly high. Specifically, according to the statistics of our Unit, we calculated/ and subsequently announced to EL.E.Y.I.A/ this amounts to 59% !! The survival rate of thawed embryos, calculated for the first half of 2015 reached 95% !! Finally let me promise the continuation of providing high quality services in order to assisting couples making their dream come true.
ΛΙΓΑ ΑΠΛΑ ΛΟΓΙΑ ΓΙΑ ΤΗΝ ΚΡΥΟΣΥΝΤΗΡΗΣΗ
ΚΡΥΟΣΥΝΤΗΡΗΣΗ ΩΑΡΙΩΝ-ΕΜΒΡΥΩΝ – VITRIFICATION
Οι τεχνικές που τελούνται μέσα σε ένα Εμβρυολογικό Εργαστήριο εξελίσσονται με εντυπωσιακούς ρυθμούς. Κάθε τι καινούριο, έρχεται να προσθέσει άλλοτε μεγαλύτερο και άλλοτε μικρότερο βήμα στην επίτευξη όλο και εντυπωσιακότερων αποτελεσμάτων στον χώρο της Κλινικής Εμβρυολογίας. Μετά την Ενδοωαρική έγχυση σπερματοζωαρίου (ICSI), η επόμενη τεράστια κατάκτηση σε ό,τι αφορά στις Εμβρυολογικές τεχνικές είναι η Υαλοποίηση ωαρίων και εμβρύων ( γρήγoρη κατάψυξη-Vitrification).
ΤΙ ΕΙΝΑΙ ΤΟ VITRIFICATION
Είναι πρωτόκολλο κρυοσυντήρησης, κατά το οποίο γίνεται χρήση υψηλών συγκεντρώσεων κρυοπροστατευτικού για ελάχιστο χρονικό διάστημα με ταυτόχρονη ιδιαιτέρως απότομη ελάττωση της θερμοκρασίας που επιτυγχάνεται με άμεση εμβάπτιση του βιολογικού υλικού στο υγρό άζωτο περιβαλλόμενο από εξαιρετικά μικρή ποσότητα κρυοπροστατευτικού. Αυτό έχει σαν αποτέλεσμα να αποφεύγονται οι πιθανές τοξικές για τα ωάρια-έμβρυα επιδράσεις της υψηλής συγκέντρωσης των κρυοπροστατευτικών με ταυτόχρονη προστασία του κυτταροπλάσματος από τη δημιουργία ενδοκυτταρικών κρυσταλλικών δομών (κρυστάλλων πάγου). Κατά την υαλοποίηση, τα μόρια κινούνται όλο και λιγότερο και τελικά σε θερμοκρασίες κάτω των -100οC δημιουργούν μία σταθερή δομή μετατρέποντας ουσιαστικά το βιολογικό υλικό σε «υαλώδη» μάζα αποφεύγοντας την «κατάψυξή» του –με την πραγματική έννοια της λέξης- και επομένως τον σχηματισμό πάγου.
Πρόκειται για τεχνική ιδιαίτερα γρήγορη, με μεγάλη σημαντικότητα των λεπτομερειών της και υψηλών απαιτήσεων για τις τεχνικές ικανότητες του Εμβρυολόγου.
Η αντικατάσταση της αργής κατάψυξης (slow freezing) από το Vitrification έρχεται να βελτιώσει θεαματικά την αποτελεσματικότητα της κρυοσυντήρησης, προσφέροντας ποσοστά επιβίωσης ωαρίων και εμβρύων μετά την απόψυξη, που ξεπερνούν το 95%-98%.
ΠΟΥ ΕΦΑΡΜΟΖΕΤΑΙ
Εξαιτίας τον υψηλών ποσοστών επιβίωσης μετά την απόψυξη, η γρήγορη κατάψυξη ωαρίων-εμβρύων έρχεται να εφαρμοστεί ευεργετικά:
Α. ΣΕ ΩΑΡΙΑ
1.Για την κρυοσυντήρηση ωαρίων γυναικών που δεν επιθυμούν ακόμα την απόκτηση απογόνου ( social freezing). Με τον τρόπο αυτό τα ωάρια «διατηρούνται» στην ηλικία της γυναίκας κατά την κατάψυξη, ανεξάρτητα από το σε πόσα χρόνια μετά θα γίνει η απόψυξή τους. Αποφεύγεται έτσι η αρνητική επίδραση του χρόνου πάνω στην ποιότητα των ωαρίων μιας γυναίκας.
2.Για την κρυοσυντήρηση ωαρίων γυναικών που πρόκειται να υποβληθούν σε θεραπεία που πιθανόν να βλάψει την ποιότητα των ωαρίων τους, όπως ακτινοβολία, χημειοθεραπεία κ.α.
3. Για τη διατήρηση ωαρίων σε περιπτώσεις που την ημέρα της ωοληψίας για οποιονδήποτε λόγο δεν είναι δυνατή η εύρεση σπερματοζωαρίων του συζύγου/συντρόφου ( αζωοσπερμία, αδυναμία εκσπερμάτησης κ.α.).
4.Δημιουργία Τράπεζας για δωρεά ωαρίων.
1.
Για τη συγκέντρωση ικανοποιητικού αριθμού ωαρίων σε περιπτώσεις γυναικών χαμηλής
απάντησης στα φάρμακα (poor responder) πριν την πραγματοποίηση της Μικρογονιμοποίησης (ICSI) και Εμβρυομεταφοράς. Με τον τρόπο αυτό, το ζευγάρι επωφελείται, γιατί χρεώνεται μόνο μία φορά το κόστος της Μικρογονιμοποίησης.
Β. ΣΕ ΕΜΒΡΥΑ
1. Για την κρυοσυντήρηση των υπεράριθμων εμβρύων μετά από εμβρυομεταφορά, τα οποία αναπτυξιακά και μορφολογικά πληρούν τα κριτήρια κατάψυξης που θέτει το Εμβρυολογικό Εργαστήριο.
Για την κρυοσυντήρηση όλων των εμβρύων μετά από προσπάθεια εξωσωματικής, όταν το ορμονικό προφίλ της γυναίκας την ημέρα της εμβρυομεταφοράς δεν συνάδει με ικανοποιητικές πιθανότητες επιτυχίας.
ΟΙ ΑΠΑΙΤΗΣΕΙΣ ΤΟΥ VITRIFICATION
Όπως προαναφέρθηκε, πρόκειται για τεχνική υψηλών απαιτήσεων κατά την εκτέλεσή της. Κατά την εφαρμογή της απαιτείται αυστηρή τήρηση του πρωτοκόλλου της, απόλυτος σεβασμός στις λεπτομέρειές του, ακρίβεια στις κινήσεις και ταχύτατοι χειρισμοί.
Ο εργαστηριακός εξοπλισμός που απαιτείται δεν είναι ούτε περίπλοκος ούτε ακριβός. Αντίθετα, τα αντιδραστήρια και τα αναλώσιμα που χρησιμοποιούνται έχουν αρκετά υψηλό κόστος.
ΠΟΥ ΦΥΛΑΣΣΟΝΤΑΙ ΤΑ ΚΑΤΕΨΥΓΜΕΝΑ ΩΑΡΙΑ-ΕΜΒΡΥΑ
Μετά την κατάψυξή τους, τα ωάρια και τα έμβρυα, διατηρούνται σε ειδικά κρυοδοχεία (ctyotankers), γεμάτα με υγρό άζωτο. Τα δοχεία είναι ιδιαίτερα αξιόπιστα και ασφαλή, γιατί διαθέτουν εξωτερικά ενδείξεις τόσο για τη στάθμη του αζώτου στο εσωτερικό τους όσο και για τη θερμοκρασία. Διαθέτουν επίσης συναγερμό ακουστικό και οπτικό σε περίπτωση που κάποια από τις παραμέτρους που προαναφέρθηκαν (στάθμη υγρού αζώτου-θερμοκρασία) πέσει κάτω από ορισμένα όρια. Μπορούν επίσης να συνδεθούν και με κεντρικό σύστημα ελέγχου που ενημερώνει μέσω sms τον υπεύθυνο Εμβρυολόγο αν κάτι από τα παραπάνω φύγει έξω από τα όρια συναγερμού.
Πέρα απ’ αυτά, στην καθημερινή πρακτική ελέγχου ποιότητας του Εμβρυολογικού Εργαστηρίου μας, καθημερινά τα δοχεία ελέγχονται και οπτικά από τον εκάστοτε επιφορτισμένο με το συγκεκριμένο καθήκον Εμβρυολόγο.
Μέσα στα δοχεία κρυοσυντήρησης, τα έμβρυα του κάθε ζευγαριού ή τα ωάρια κάθε γυναίκας, φυλάσσονται σε μία απόλυτα καθορισμένη θέση, η οποία είναι αποκλειστικά δική τους για όσο χρόνο διαρκεί η κρυοσυντήρηση. Στη θέση αυτή το κατεψυγμένο βιολογικό υλικό είναι επιπλέον χαρακτηρισμένο με το ονοματεπώνυμο της γυναίκας, την ημερομηνία κατάψυξης και με τον μοναδικό κωδικό που συνοδεύει τη γυναίκα στη Μονάδα μας. Επιπλέον, η θέση καταχωρείτε τόσο στο φάκελο του ζευγαριού/γυναίκας, σε ειδικό αρχείο κατάψυξης του Εμβρυολογικού Εργαστηρίου, όσο και ηλεκτρονικά σε ειδικό πρόγραμμα βάσης δεδομένων της ASSISTING NATURE.
Τα ωάρια και τα έμβρυα επομένως είναι απολύτως ασφαλή από κάθε άποψη και σε ό,τι αφορά στην ακεραιότητά τους και σε ό,τι αφορά στην διατήρηση της ταυτότητά τους.
Βιολογικός περιορισμός για το χρόνο κρυοσυντήρησης δεν υπάρχει, δηλ τα κατεψυγμένα ωάρια και έμβρυα μπορούν να διατηρηθούν για όσο χρονικό διάστημα χρειαστεί χωρίς καμιά διαφορά στην επιβίωσή τους ή την ποιότητά τους μετά την απόψυξη.
Νομικός όμως περιορισμός υπάρχει και τα ζευγάρια/γυναίκες θα πρέπει να ενημερώνονται πριν την κατάψυξη και να υπογράφουν σχετικές συγκαταθέσεις. Είναι δε, υποχρέωση του ζευγαριού/γυναίκας να επικοινωνεί κάθε χρόνο με τη Τράπεζα Κρυοσυντήρησης και να ενημερώνει τον αρμόδιο Εμβρυολόγο για το τι θέλουν να συμβεί στο κρυοσυντηρημένο βιολογικό υλικό τους τον επόμενο χρόνο (να συνεχίσει να διατηρείται, να καταστραφεί, να δωρηθεί, να χρησιμοποιηθεί για ερευνητικούς-θεραπευτικούς σκοπούς).
ΠΟΣΟΣΤΑ ΕΠΙΤΥΧΙΑΣ ΣΤΗΝ ASSISTING NATURE
Το ποσοστό επίτευξης εγκυμοσύνης στην ASSISTING NATURE μετά από απόψυξη και μεταφορά κρυοσυντηρημένων εμβρύων, είναι ιδιαίτερα υψηλό. Συγκεκριμένα, σύμφωνα με τα στατιστικά στοιχεία της Μονάδας μας όπως τα καταγράψαμε, υπολογίσαμε και εν συνεχεία καταθέσαμε στην ΕΛ.Ε.Υ.Ι.Α , αυτό ανέρχεται σε 59% !!
Το δε ποσοστό επιβίωσης των εμβρύων, όπως αυτό υπολογίστηκε για το πρώτο εξάμηνο του 2015 αγγίζει το 95% !! Κλείνω, με την υπόσχεση για συνεχή παροχή υψηλής ποιότητας υπηρεσιών με σκοπό να είμαστε πάντα με τον δικό μας τρόπο δίπλα σας στην προσπάθειά σας για την απόκτηση ενός παιδιού.
